亚博体育app官方下载地址水对感染性创面抗炎修复影响的初步研究
来源:西安戴美医疗科技有限公司 | 作者:本站 | 发布时间:2011-10-22 | 浏览:2611次 【关闭此页
亚博体育app官方下载地址水对感染性创面抗炎修复影响的初步研究
黄华军,余斌,林庆荣,王博炜,陈辉强
(南方医科大学创伤骨科,广州 510515)
【摘要】目的  研究亚博体育app官方下载地址水对感染性创面的抗炎与修复作用的效果。方法  将50只vista大鼠随机分成5组,洗必泰治疗组、低、中、高浓度亚博体育app官方下载地址水治疗组、对照组(不做特殊处理)各10只。首先在大鼠背部造成实验性感染性伤口,感染成功后48 h进行治疗,每天1次,9天为1疗程。并在治疗前、治疗后3、6、9 d后分别对感染伤口的变化进行观察;并抽取鼠尾静脉血检查白细胞计数,切取皮肤、肌肉组织标本进行光镜病理分析。结果  综合各项指标亚博体育app官方下载地址水治疗组的效果明显优于对照组以及洗必泰治疗组,其中10ug/L与20ug/L浓度组的优于5ug/L组,前两者治疗效果相当。
【关键词】亚博体育app官方下载地址水; 感染性创面; 抗炎修复
The role of ozone water on antiinflammatory and reparation of infected wound  HUANG Hua-jun YU Bin LIN Qing-rong WANG Bo-wei CHEN Hui-qiang
Department Orthopedic Surgery, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China
AbstractObjective  To studythe healing effect of ozone water on the infected wound. Methods  50 vista rats were randomly divided into five groups: chlorhexidine treatment group、5ug/L、10ug/L 、20ug/L ozone water treatment group and contrast group(without any special treatment) . The back of rats were artificially formed the infected wound. After 48 hours of infection,the chlorhexidine or ozone water was given,once a day,for 9 times. Before and after the 3rd,6th,9th day of treatment,the alteration of infected wound was observed. The WBC of tail venous blood was detected and the incised skin and musle tissue was lstopathologically analysed by
 
作者简介:黄华军(1983-),男,广东湛江人,硕士,电话 020-62842206,手机 15820282438,电子信箱tianjixuanying@163.com;通讯作者:余斌,南方医科大学南方医院创伤骨科,510515, 电话 020-61641746,电子信箱 yubinol@163.com
广东省自然科学基金项目, 编号:8151051501000079
light microscope. Result  The study demonstrates that ozone water have the better effect to promote the healing of infected wound, especially the result of 10ug/L and 20ug/L are better, and they have the same result.  【Key words】 wound infection;ozone water;anti-inflammatory;reparation
亚博体育app官方下载地址(O3)是由医用亚博体育app官方下载地址发生器把氧气电离而生成, 具有较强的氧化作用,能通过强烈的氧化还原作用迅速杀灭细菌,为广谱有效的强杀菌剂。20 世纪80 年代,意大利Siena 大学Bocci教授[1]对亚博体育app官方下载地址的作用机制作了大量基础和临床研究,认为亚博体育app官方下载地址可作为生理激活因子,引起多种生理反应,改善细胞供氧及代谢,起到消炎、镇痛和免疫调节的作用。因而在临床得到了广泛的应用并取得了很多令人满意的疗效[2]。近年来,亚博体育app官方下载地址气体用于骨科常见疾病的治疗已十分广泛,如椎间盘突出症 [3]、运动系统损伤等[4-5],并且取得了新的进展。但迄今为止尚未见亚博体育app官方下载地址水对感染性创面的抗炎修复影响的试验研究,本实验通过动物模型研究亚博体育app官方下载地址消毒剂(亚博体育app官方下载地址水)对感染性创面的抗炎及修复的效果。
 1 材料与方法
1.1  vista大鼠50只.体重280-340g.雌雄各半,由南方医科大学动物实验中心提供。随机分为5组:洗必泰治疗组、低(5ug/L)、中(10ug/L)、高浓度(20ug/L)亚博体育app官方下载地址水治疗组、对照组各10只。按组编号,分笼按常规饲养。
1.2  亚博体育app官方下载地址水的制备: 将双蒸水倒入亚博体育app官方下载地址消毒剂生成机(德国哈斯乐亚博体育app官方下载地址发生器OZONOSAN Alpha Plus 1107)的储水槽中(容量约2000ml) ,室温20℃,10 min后储水容器内的水已充满亚博体育app官方下载地址气味,分别制取浓度为5mg/ L、10mg/ L、20mg/ L的亚博体育app官方下载地址水。所获的亚博体育app官方下载地址水立即用于创面的清洗消毒。
1.3  实验前24h,用脱毛剂在各组大鼠的脊背部和左侧大腿处脱毛备皮。50只vista大鼠备皮后,戊巴比妥麻醉,背部完全暴露皮肤3~5cm,将皮肤暴露消毒,铺洞巾,沿脊柱左侧切开皮肤全层直达深筋膜,切口长约5cm,开放创口,常规止血后,伤口均匀涂上南方医院细菌室提供的金黄色葡萄球菌(菌液浓度>20亿/ml)进行人工致炎。在左侧大腿切开皮肤全层,深达浅层肌肉,切口长约5cm,同样方法致炎。
1.4  观察指标及方法:(1)感染伤口炎症表现以及各个时间段创面愈合情况比较。(2)白细胞计数:各组均于感染前、感染后48h、治疗后3,6,9d分别采鼠尾静脉血,检查血常规,记录白细胞计数。(3)光镜检查:各组均于致炎后48h、治疗后3,6,9d分别取切口皮肤、肌肉组织标本,用固定液,石蜡包埋、切片、HE染色后,光镜观察。
2 结果
人工感染伤口所见:感染后48h,各组均可见创面周围红肿,较多量脓性分泌物及坏死组织,各组感染情况无明显差异。
治疗后创面愈合情况比较:治疗后3d,洗必泰组部分伤口结痂,其周围仍有较明显的红肿及分泌物;低浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口大部分结痂,但其周围仍有轻度红肿及少量分泌物和坏死组织;中浓度亚博体育app官方下载地址水组大部分伤口已结痂,表面较干燥,局部轻度的红肿,部分伤口有少量分泌物;高浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口表现与中浓度亚博体育app官方下载地址水组无明显差别;对照组伤口表面及周围明显红肿,有麋烂面及较多的分泌物及坏死组织。治疗后6d,洗必泰组伤口周围轻度红肿,部分伤口结痂,但仍有少许分泌物。低浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口全部结痴,局部干燥;中浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口瘢痕明显缩小,与高浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口表现无明显差别;对照组伤口局部仍有红肿及渗液,少部分伤口有结痂,但结痂周围仍有较多的分秘物。治疗9d后,洗必泰组伤口全部结痂,局部干燥;中、高浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口缩小2/3以上;低浓度亚博体育app官方下载地址水组伤口愈合情况基本同前者治疗6d后的情况;对照组伤口完全结痂,但周围有红肿及少量分泌物。
白细胞总数变化:各组的白细胞总数感染前、后以及治疗后各阶段的多重比较经统计学分析,差异有显著性(W=0.010,P=0.250,符合球形检验,F=54.968,P<0.01),而组间差异无显著性(P>0.05)。治疗后各组间在相同时间(3,6,9 d)细胞总数的两两比较差异性见表1。在治疗各个阶段,治疗组与对照组比较以及洗必泰组与亚博体育app官方下载地址水治疗组比较均有显著性的差异(P<0.05),治疗3、6、9d后,不同浓度亚博体育app官方下载地址水治疗组间两两比较,10ug/L与20ug/L组无明显差异(P﹥0.05),而前两者与5ug/L组在治疗后3、6d后有显著性差异(P<0.05)。而在治疗后9d,三种浓度的亚博体育app官方下载地址水治疗组白细胞的总数差异不显著。
表1 人工致炎前后及不同时间大鼠白细胞总数的变化(`x±s,THSD/CU MM )

时间(d)
对照组
洗必泰组
20ug/L亚博体育app官方下载地址水组
10ug/L亚博体育app官方下载地址水组
5ug/L亚博体育app官方下载地址水组
感染前
9.55±0.95
11.65±0.65
12.45±1.75
10.60±0.50
11.02±1.95
感染后2
33.35±1.05
33.80±3.00
35.75±2.75
36.45±1.55
35.90±0,50
治疗后3
37.60±1.20
36.50±0.90
22.70±0.30
21.0±0.20
28.45±2.35
治疗后6
31.05±3.35
36.30±2.60
13.30±0.60
13.65±0.85
23.10±0.70
治疗后9
30.85±9.55
34.95±8.75
10.65±1.05
9.90±0.80
16.05±0.35

光镜所见:人工致炎后48h,各组皮肤、肌肉均可见较为严重的感染现象。治疗3d后,洗必泰组炎症病理改变不明显;亚博体育app官方下载地址水治疗组炎症病理减轻,可见新生表皮细胞,以10ug/L组与20ug/L组明显;对照组炎症改变进一步加重,出现肌纤维坏死。治疗6d后,洗必泰组炎症减轻不明显;亚博体育app官方下载地址水治疗组炎症病理进一步减轻,其中10ug/L组与20ug/L组上皮结构修复完整,无炎性渗出;对照组皮肤、肌肉坏死表现进一步加重。治疗后9d,洗必泰组炎症表现减轻,开始出现部分表皮细胞连接;亚博体育app官方下载地址水治疗组只有轻微的炎症表现,无渗出,10ug/L组与20ug/L组大部分恢复正常皮肤,肌纤维肉芽组织大量生长;对照组出现慢性炎症的表现。            

感染后48h:各组可见表皮溃疡形成,大量的炎性渗出物,坏死区内有明显肌细胞溶解现象并伴有严重的炎细胞浸润(HE´200)
 

治疗后3d:洗必泰组真皮层可见较多的炎细胞和炎性渗出物,部分肌纤维玻璃样变性(a,b);5ug/L亚博体育app官方下载地址水组痂下新生的表皮细胞未连接,肌纤维不同程度增生(c,d);
10ug/L组与20ug/L亚博体育app官方下载地址水组新生的表皮细胞已部分连接,肌纤维少数炎细胞浸润(e,f);对照组伤口真皮层以及肌间隔间大量炎细胞浸润,部分肌纤维坏死(g,h)。以上各图为(HE´200)

治疗后6d:洗必泰组少量新生表皮细胞,肌纤维不同程度增生(a,b);5ug/L亚博体育app官方下载地址水组真皮层可见较多的炎细胞和炎性渗出物,肌纤维少数变性(c,d);

10ug/L组与20ug/L亚博体育app官方下载地址水组上皮结构修复完整,无炎性渗出,可见明显的肉芽组织生成(e,f);对照组仍有水肿和炎性渗出物、较多量坏死组织(g,h)。以上各图为(HE´200)

治疗后9d:洗必泰组部分表皮细胞连接,真皮层以及肌肉组织少量炎细胞浸润(a,b);5ug/L亚博体育app官方下载地址水组接近正常皮肤,肌纤维可见少数炎细胞以及淋巴细胞(c,d);

10ug/L组与20ug/L亚博体育app官方下载地址水组恢复正常皮肤,肌纤维肉芽组织大量生长(e,f);对照组可见吞噬细胞浸润,伴有血管内皮细胞肿胀、管壁结构紊乱炎细胞浸润及毛细血管闭塞(g,h)。以上各图为(HE´200) 
3 讨论
传统的抗感染局部用药主要有化学消毒剂、重金属盐类、抗生素等。但这些传统方法往往存在效果不理想、使用不便、有毒副作用、局部有效浓度难以保持或易于产生耐药性等不足[6] ,效果难以肯定。
随着医疗界抗菌药物的广泛使用,耐药菌明显增多,院内感染时有发生,使用亚博体育app官方下载地址作为消毒剂也日益广泛。由于亚博体育app官方下载地址的强氧化性和广谱杀菌能力,因而具有消毒、杀菌、除臭、防霉等功能;同时亚博体育app官方下载地址具有很高的氧化还原电位,在水中不稳定,能够迅速发生氧化还原反应,产生具有强氧化作用的活性氧族、过氧化氢及羟基等,能氧化细菌的细胞壁或其他微生物的外壳,直至穿透外壳与其体内的不饱和键化合而发挥杀菌作用,因此不会产生耐药性,同时其对人体的皮肤、黏膜、伤口等刺激性较小,可直接用来治疗感染。国内外的研究已经证实,局部高浓度的氧可促进免疫调理作用,加速创面愈合[712] 。亚博体育app官方下载地址在其消毒杀菌结束后自解还原成为两个氧原子的分子氧(O2),不产生任何残留和二次污染,因而被称为“绿色环保元素”。国内文献报道,临床使用亚博体育app官方下载地址水进行创面雾状、束流喷射清创,以及亚博体育app官方下载地址消毒水治疗口腔疾病均取得满意的效果[8-10]。因此,消毒杀菌、局部氧疗、不易耐药、无毒副作用、环保这五大特点使亚博体育app官方下载地址水成为外用消毒剂中的新星。亚博体育app官方下载地址水的主要缺点是有效作用时间较短暂,水中的溶解度为氧的13倍,其降解主要依赖于温度,在蒸馏水或自来水中的半衰期大约是 20min(20℃),然而在二次蒸馏水中,经过85min后亚博体育app官方下载地址分解只有10%,若水温接近0℃时,亚博体育app官方下载地址会变得更加稳定,可达数日之久 [11]。再者亚博体育app官方下载地址水制备设备体积小,制备简单迅速,在普通家用冰箱中保存可使用3-4天,这弥补了其半衰期短的不足。
实验证明,Vista大鼠的人工致炎伤口经亚博体育app官方下载地址水治疗前后,从伤口表面肉眼观察的变化、显微结构、白细胞计数等的变化,观察结果基本一致。亚博体育app官方下载地址水治疗组各项指标明显优于洗必泰治疗组及对照组,其中中、高浓度亚博体育app官方下载地址水组又优于低浓度亚博体育app官方下载地址水组,尤其表现在伤口感染的早中期。伤口感染的早期,亚博体育app官方下载地址水清创治疗起效快,感染控制迅速,治疗后3天感染即被控制住,证实了亚博体育app官方下载地址水消炎、杀菌、控制感染的良好效果。本实验采取的三种浓度的亚博体育app官方下载地址水治疗效果显示,中、高浓度亚博体育app官方下载地址水的抗炎消毒效果优于低浓度组,而中与高浓度组的效果没有明显差异,提示在临床应用中, 10-20ug/L的亚博体育app官方下载地址水已足够控制甚至消灭创面感染。
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